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细胞质酵母双杂交筛选与乙型肝炎病毒X蛋白相互作用的肝细胞蛋白

ytoTrap yeast two-hybrid assay screening for hepatocellular proteins interacting with HBx protein

中文摘要英文摘要

目的 筛选与乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)相互作用的肝细胞蛋白。 方法 PCR扩增HBx基因并克隆入诱饵载体pSos,在证实HBx蛋白不具有自激活作用的前提下,以CytoTrap细胞质酵母双杂交系统筛查与HBx蛋白相互作用的肝细胞蛋白。 结果 构建了诱饵载体pSos-HBx,Western blot检测显示在cdc25Hα酵母中成功表达HBx蛋白。CytoTrap细胞质酵母双杂交筛查表明HBx可与30种肝细胞蛋白相互作用,即:MYLK、TCTP、EKI1、ECSIT、MRLC2、VCP、USP15、PSMC1、PSMD4、YWHAH、FN1、NACA、MPHOSPH6、GSTO1、TOMM70A、ORM2、ITIH3、SF3A3、PREPL、PTPRA、SMARCC1、BRWD2、CP、ETNK1、PPM1A、LSM8、AMACR、AFM、IQWD1、RBX1。 结论 HBx与多种肝细胞蛋白相互作用,可能影响肝细胞内信号通路、蛋白降解、肿瘤侵袭转移、凋亡等多种功能。

o screen the hepatocelluar proteins interacting with HBx protein of hepatitis B virus, HBx gene was amplified by means of PCR and cloned into the bait vector pSos. After exclusion of self-activation capacities of HBx and verification of HBx expression in yeast strain cdc25Hα, CytoTrap yeast two hybrid assay was performed using a human liver cDNA library to screen the liver cell proteins interacting with HBx. 30 liver cell proteins interacting with HBX were screened including MYLK、TCTP、EKI1、ECSIT、MRLC2、VCP、USP15、PSMC1、PSMD4、YWHAH、FN1、NACA、MPHOSPH6、GSTO1、TOMM70A、ORM2、ITIH3、SF3A3、PREPL、PTPRA、SMARCC1、BRWD2、CP、ETNK1、PPM1A、LSM8、AMACR、AFM、IQWD1、RBX1. HBx may effect multifarious function of hepatocytes such as cell signal pathways, proteins degradation, tumor invasion, metastasis and apoptosis.

焦伯延、陈婉南、林旭、林万松

基础医学细胞生物学分子生物学

乙型肝炎病毒X蛋白酵母双杂交

Hepatitis B virusHBxyeast two-hybrid

焦伯延,陈婉南,林旭,林万松.细胞质酵母双杂交筛选与乙型肝炎病毒X蛋白相互作用的肝细胞蛋白[EB/OL].(2014-08-22)[2025-08-02].http://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201408-208.点此复制

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