腹膜间皮细胞PPARγ的表达及其配体对CD40和ICAM-I的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖体激活受体γ（PPARγ）在大鼠腹膜间皮细胞（RPMCs）中的表达以及LPS的调节作用，并探讨PPARγ天然配体15d-PGJ2及人工合成配体Ciglitazone对RPMCs表达CD40和ICAM-I的影响。方法 分离、培养RPMCs，常规传代及鉴定，取第二代细胞用于实验研究。LPS不同浓度（0.1&micro;g/ml，1.0&micro;g/ml，10&micro;g/ml，50&micro;g/ml，100&micro;g/ml）、LPS（1μg/ml ）处理后不同时间点及15d-PGJ2（3μmol/L）、Ciglitazone（10μmol/L）作用于细胞36h后收集细胞。RT-PCR检测PPARγ、CD40以及ICAM-I mRNA表达；免疫细胞化学检测PPARγ在RPMCs中的分布；Western 印迹检测PPARγ及ICAM-I蛋白表达。结果 （1）常规培养的RPMCs表达一定量PPARγ，表达部位主要分布于RPMCs细胞核内，细胞浆微弱表达；（2）随着LPS浓度逐渐增大，PPARγ蛋白表达水平呈逐渐增高的趋势，LPS浓度为10&micro;g/ml时其表达为最高峰。LPS （1μg/ml）作用12h PPARγ蛋白表达最强，PPARγ1表达高于PPARγ2；之后显著降低，持续至72h。（3）LPS刺激后RPMCs CD40mRNA表达显著增强；15d-PGJ2、Ciglitazone显著降低CD40mRNA表达（P均<0.01）。（4）LPS刺激后RPMCs ICAM-I蛋白表达显著增加；15d-PGJ2增加LPS介导的ICAM-I mRNA表达（P<0.01），但显著抑制ICAM-I 蛋白表达（P<0.05）；Ciglitazone 对LPS介导的ICAM-I mRNA和蛋白表达均有显著抑制作用（P均<0.05）。结论 RPMCs结构性表达PPARγ；LPS在一定时间范围内对RPMCs PPARγ表达具有显著增加作用；PPARγ配体可显著抑制LPS介导的CD40mRNA和ICAM-I蛋白的表达。提示RPMCs功能性表达PPARγ，可能通过负性调节炎症介质分泌而参与腹腔局部防御。